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如何測(cè)定青稞秸桿中蛋白質(zhì)含量

更新時(shí)間:2010-12-17  |  點(diǎn)擊率:2795

  我國(guó)年產(chǎn)秸桿達(dá)5億噸,其中除少部分秸桿用作牛羊等反芻動(dòng)物飼料或還田作肥料外大部分秸桿被焚燒、廢棄既造成了資源的巨大浪費(fèi)也對(duì)環(huán)境產(chǎn)生污染。青稞(HordeumVulgerL.var.nudumHook.f)在植物分類學(xué)上屬于禾本科小麥族大麥屬于大麥變種之一,在其他產(chǎn)區(qū)也稱米大麥、米麥、裸麥。主要分布在我國(guó)西藏、四川、云南、甘肅、青海等地。青稞秸桿中含有許多有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如:氨基酸、微量元素、β—葡聚糖等,是自然界存在的巨大的可再生資源,為充分利用這一營(yíng)養(yǎng)的可再生資源,本文對(duì)其秸桿中蛋白質(zhì)的含量進(jìn)行測(cè)定。蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ),是構(gòu)成生物體細(xì)胞的重要成分,是生物體發(fā)育及修補(bǔ)的原料,一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質(zhì)。人及動(dòng)物只能從食品得到蛋白質(zhì)及其分解產(chǎn)物,來構(gòu)成自身的蛋白質(zhì),故蛋白質(zhì)是人體及動(dòng)物重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),也是食品中重要的營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)。其具有糖類和脂肪不可代替的作用,是動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育所必要的營(yíng)養(yǎng)元素之一,是氨基酸以肽鍵相結(jié)合形成的、極其復(fù)雜的高分子化合物,是生物體主要的含氮物質(zhì)。飼料是否合格,粗蛋白含量多少是一項(xiàng)重要指標(biāo)。下面就用飼料中粗蛋白含量的常規(guī)方法—凱氏氮法測(cè)定其蛋白質(zhì)的含量。

  儀器及試劑:儀器為藥物粉碎機(jī)、分析天平、凱氏定氮儀(包括凱氏定氮蒸餾裝置和消化爐)、凱氏燒瓶。試劑為濃硫酸(AR級(jí));50%氫氧化鈉溶液;硫酸鉀;硫酸銅;0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液;甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑。本文我們采用GB/T5009.5—2003標(biāo)準(zhǔn)法來測(cè)定蛋白質(zhì)含量。

  實(shí)驗(yàn)過程:將成熟后的枯黃的莖稈粉碎過篩后備用。去試樣0.500~2.000g準(zhǔn)確至0.0002g,放入凱氏燒杯中,加入10g無水硫酸鉀0.5g硫酸銅和20ml濃硫酸。和2粒玻璃珠,將凱氏燒杯置于電爐上加熱,開始小火,代樣品焦化,泡沫消失后,再火力直至呈透明的藍(lán)綠色,然后再繼續(xù)加熱,約2h;去出凱氏燒瓶加入約200ml蒸餾水,連接定氮蒸餾裝置,將餾出液出口的冷凝管下端插入盛有50ml含數(shù)滴甲基紅的01.mol/L標(biāo)液的三角燒瓶中,在凱氏燒瓶?jī)?nèi)加入少許沸石緩緩加入80ml50%氫氧化鈉溶液,立即連接好定氮球,檢查整個(gè)定氮裝置是否漏氣,用直接火源加熱蒸餾,蒸餾至凱氏燒瓶?jī)?nèi)殘?jiān)种粫r(shí),打開定氮球與凱氏燒瓶的塞口,停止加熱;1)用0.1000mol/LHCl標(biāo)液進(jìn)行滴定,移取樣品至錐形瓶中用0.1000mol/LHCl標(biāo)液進(jìn)行滴定,直至標(biāo)準(zhǔn)溶液由藍(lán)綠色變成灰紅色為終點(diǎn)。此時(shí)消耗鹽酸的量記為V2;2)空白實(shí)驗(yàn)取與消化樣品時(shí)同樣的量的硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸,按上述方法進(jìn)行消化、定容到100ml,的空白消化液,取同量空白消化液進(jìn)行蒸餾,用指示劑滴定至紅色消失為終點(diǎn)。此時(shí)消耗鹽酸的量記為V1。

  結(jié)果計(jì)算:總氮量(%)=C*(V2-V1)÷1000×14.1/w;注C-鹽酸的摩爾溶液;V1-空白滴定消耗標(biāo)準(zhǔn)液的量(ml);V2-樣品滴定消耗標(biāo)準(zhǔn)酸液的量(ml);w-樣品的質(zhì)量;14.1-氮的摩爾質(zhì)量。蛋白質(zhì)(%)=總氮量%*K;K-氨轉(zhuǎn)換為蛋白質(zhì)的系數(shù)取5.7。

  結(jié)論:從我們的的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),這批青稞秸稈蛋白質(zhì)含量較低,平均為1.482,與作為飼料時(shí)蛋白質(zhì)含量在2-8%之間還有一定的差距。因此直接將青稞秸稈作為飼料是不合理的,因?yàn)槠涞鞍踪|(zhì)含量低、質(zhì)地粗硬,適口性差且不易消化和吸收,但是秸稈中含有70%的碳水化合物和植物光合作用所積累的一半能量,且分布廣泛,競(jìng)爭(zhēng)性用途少,開發(fā)利用潛力很大。